又白又嫩毛又多15p,交换俱乐部娇妻奶呻吟啊视频,国产在线,女邻居的大乳中文字幕bd

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 細(xì)胞衰老檢測具體方法
細(xì)胞衰老檢測具體方法
點(diǎn)擊次數(shù):528 更新時(shí)間:2023-12-11

      細(xì)胞衰老是細(xì)胞在正常環(huán)境條件下發(fā)生的功能減退、逐漸趨向死亡的現(xiàn)象。衰老的細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞體積變大,呈扁平狀;細(xì)胞核變大,核膜內(nèi)陷,染色質(zhì)聚集、固縮、裂解;胞質(zhì)內(nèi)顆粒增加,有空泡形成;線粒體的數(shù)目及形狀發(fā)生改變;膜流動(dòng)性降低;溶酶體內(nèi)容物增多,導(dǎo)致溶酶體酶β-半乳糖苷酶活性升高。衰老細(xì)胞所具有的上述特征成為各種細(xì)胞衰老檢測手段的依據(jù)。

其中,對衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶的檢測是有效檢測細(xì)胞衰老的經(jīng)典方法。X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)是β-半乳糖苷酶的底物,X-Gal本身無色,經(jīng)β-半乳糖苷酶水解后產(chǎn)生半乳糖和藍(lán)色的5-溴-4-氯-靛藍(lán)。利用X-Gal的這個(gè)特點(diǎn),可以間接對β-半乳糖苷酶的活性進(jìn)行測定。衰老細(xì)胞中的溶酶體內(nèi)容物通常增多,使得溶酶體酶β-半乳糖苷酶的活性升高,故可以X-Gal作為底物對細(xì)胞衰老的情況進(jìn)行檢測。

1、細(xì)胞衰老檢測:

(1)細(xì)胞接種前在6孔培養(yǎng)板中預(yù)先放置滅菌的細(xì)胞片,每孔加入1×10E5個(gè)細(xì)胞,37℃ 5% CO2條件下培養(yǎng)過夜,使細(xì)胞在細(xì)胞片上生長。

(2)在超凈工作臺(tái)中吸棄6孔培養(yǎng)板中的培養(yǎng)液,加入×1 PBS,洗滌細(xì)胞1次,隨后加入2%甲醛/0.2%戊二醛固定液,室溫條件下固定3~5分鐘。

(3)吸棄2%甲醛/0.2%戊二醛固定液,加入×1 PBS,洗滌細(xì)胞3次,每次3分鐘。

(4)吸棄×1 PBS,加X-Gal溶液以浸沒細(xì)胞片為宜,37℃孵育4~8小時(shí)或過夜,用保鮮膜包被6孔培養(yǎng)板以防染液蒸發(fā)。

(5)取出細(xì)胞爬片,去離子水沖洗2次,再次用固定液固定4分鐘,流水輕輕沖洗。

(6)將細(xì)胞爬片按此順序脫水、透明∶95%酒精I(xiàn)(2分鐘)→95%酒精Ⅱ(2分鐘)→100%酒精I(xiàn)(2分鐘)→100%酒精I(xiàn)(5分鐘)→二甲苯I(2分鐘)→二甲苯Ⅱ(2分鐘)。

(7)中性樹膠封片。

(8)在普通光學(xué)顯微鏡下觀察衰老細(xì)胞形態(tài)。

每張片子鏡下計(jì)數(shù)400個(gè)細(xì)胞,確定X-Gal染色陽性細(xì)胞(衰老細(xì)胞)在細(xì)胞群體中的所占的百分比即衰老細(xì)胞率(藍(lán)染細(xì)胞數(shù)/總計(jì)細(xì)胞數(shù)×100%)。

2、細(xì)胞衰老檢測注意事項(xiàng):

①X-Gal溶液需要現(xiàn)用現(xiàn)配。

②細(xì)胞固定時(shí)間過長或固定之后清洗不干凈,均會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)。


在线视频国产欧美另类| 久久9精品区-无套内射无码| 体育生gay白袜调教video| 亚洲av无码专区在线观看下载| 婷婷开心激情综合五月天| 加勒比女海盗| 免费影视观看网站入口| b站禁止转播404入口| 久久高清内射无套| 欧美性xxxxx极品少妇小说| 亚洲 成人 综合 另类 图区| 男受被做哭激烈娇喘gv视频| 亚洲色无码a片一区二小说| 人鲁交yazhonghucxx| 绝色教师美妇沉沦为玩物| 粗大的内捧猛烈进出| 欧美精品无码一区二区三区| 国产精品女a片爽爽波多洁衣| 无码人妻久久一区二区三区69| 狠狠干狠狠爱| 欧美+日韩+国产| 亚洲精品无码久久| 上课忘穿内裤被老师摸到高潮| 色综合久久五月色婷婷| 免费啪啪a片aaaa片老太婆交| 色戒在线免费观看| 插我舔内射18免费视频| 性vodafonewifi另类| 黑人大战日本娇小xxoo| 国产成人免费ā片在线观看| 国产l精品国产亚洲区久久| 9孩岁女精品╳片| 日本爽快片18禁片免费久久 | 国产99久久久国产精品~~牛 | 国产精品a∨一区二区三区| 吉林小伟无套gay| 天天躁日日躁狠狠躁欧美老妇小说| 蜜桃色欲av久久无码精品| 亚洲熟妇少妇任你躁在线观看无码| 亚洲国产日韩a在线欧美2020| 深深的进入美妇紧窄|